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熒光顯微鏡--顯微熒光分光光度計(jì)

更新時間:2012-01-13   點(diǎn)擊次數(shù):2554次

熒光顯微鏡--顯微熒光分光光度計(jì)

顯微熒光分光光度計(jì)是一種在一定波長范圍內(nèi)測定熒光顯微物體所發(fā)射的熒光量的儀器,實(shí)質(zhì)上它是分光光度計(jì)與熒光顯微鏡的結(jié)合。它通過測量某些生物學(xué)結(jié)構(gòu)(例如膠原纖維、葉綠體等)的自發(fā)熒光或用熒光染料染色的某些生物學(xué)物質(zhì)的繼發(fā)熒光,從更至圭物至標(biāo)本進(jìn)行定量分析。顯微熒光分光光度計(jì)與顯微分光光度計(jì)的差別僅僅是所使用的顯微鏡不同而已,關(guān)于熒光顯微鏡的構(gòu)造、原理及其使用已經(jīng)在第九章中作了詳細(xì)介紹,這里不再重復(fù)。

熒光顯微鏡--顯微熒光分光光度計(jì)同以光的吸收為基礎(chǔ)的顯微分光光度術(shù)相比較,顯微熒光光度術(shù)具有一些明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先,當(dāng)背景足夠暗時,達(dá)個方法對于非常少量的熒光物質(zhì)是高度靈敏的、一般熒產(chǎn)法所至染料的zui低濃度比其他吸收法低1萬倍。第二,由于熒光物質(zhì)本身就是自發(fā)光物體,不管測闌內(nèi)物體的形狀是規(guī)則的還是不規(guī)則的,不管物質(zhì)分布是均勻的還是不均勻,出物體所輻射酌光量子將在光電倍增管上產(chǎn)生相同的效應(yīng),因此對于顯微英光光度木來說就避免了分布誤差。第三,使用這種方法操作比較簡便,測量迅速,特別適合于大量樣品的分析。因此,顯微熒光分光光度計(jì)已經(jīng)應(yīng)用于蛋白質(zhì)、核酸等大分子物質(zhì)的細(xì)胞化學(xué)和組織化學(xué)、熒光抗體技術(shù)和酶標(biāo)技術(shù)等廣泛的領(lǐng)域。同時,門描技術(shù)也已被

 

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